華東地區AMF菌種保藏與研發中心
East China AMF Strain Collection and R&D Center

誘導培養

誘導培養通常是為獲得單一菌種資源的必要條件。野外直接收集的孢子可能存在如下問題:1) 看似健康,但實際沒有活力。2) 由于根的色素、土壤理化性質及土壤微生物的影響而失去或改變其原有結構特征。3) 直接采集的土壤樣品中僅僅是那些有足夠活性和生物量并結孢子的種,而誘導培養會産生不同的結果。

為避免資源的遺漏和減少鑒定工作的誤差,樣品采集後,應在溫室内利用原始土壤作為培養基質進行誘導培養,以獲得健康的孢子作為接種物來源進行單孢純化培養和鑒定。誘導培養在下列情況下更為重要:1)植物根系有明顯侵染,但未見或少有孢子(幹旱或水生環境常見)。2)土壤微生物活性高,特别在熱帶高溫高濕和有機質高的地方,多數孢子被分解或改變結構,使鑒定困難。3)需要獲得不同種的大量健康孢子。

步驟:

1. 按質量控制要求準備高粱種子(參見“質量控制”部分)、滅菌的沸砂基質、塑料花盆 (1加侖塑料花盆) 和潔淨的水,備用。

2. 在幹淨複印紙上或塑料封口袋中,将準備好進行誘導培養的土樣與滅菌的沸砂基質按體積比1:1混勻,裝入消毒的塑料花盆3/4處,用潔淨的水澆透,播種催芽的高梁種子50-100粒。種子上面加蓋0.5-1 cm滅菌的沸砂基質,澆少量潔淨的水,注意避免将種子沖到基質表面。

3. 放置光照培養室生長至少3個月 (見右圖),培養條件參見“質量控制”部分。在植物缺水時适量澆潔淨的水,在植物顯示缺肥時補澆适量20%的霍格蘭營養液。

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